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全自动 AMES 实验解决方案

方案概述

慧荣和全自动 AMES 仪是一台依据 AMES 实验 ( 细菌回复突变实验 ) 标准流程开发的自动化实验仪器。该仪器将底层培养基分装、加样、移液、混匀、铺板等一系列操作实现全自动化,实验过程中无需人工值守,可极大减少 AMES 实验初期繁复的人工操作,减少人为误差,提高实验效率和实验精度。

背景介绍

Ames试验是较受重视的快速初筛化学致癌物的试验方法。Ames试验是快速地鉴别化学品、新农药和新食品添加剂的致癌性,作为致癌物质的筛选法而被广泛应用, 可以检测许多物质的致癌性。Ames试验已广泛应用于医药研究、食品和化妆品行业,以及环境毒理学和环境监察等领域。这种试验可以快速准确地判断某种化学物质的致突变性和潜在致癌性,从而避免了对于人类和环境的危害。Ames试验具有操作简单、成本低、速度快等优点,是一种非常重要的现代化毒理学试验方法。

参考标准

1) GB 15193.4-2014 食品安全国家标准 细菌回复突变试验。

2) YY/T 0127.10-2009 口腔医疗器械生物学评价.第2单元:试验方法.鼠伤寒沙门氏杆菌回复突变试验(Ames试验)。

应用场景

全自动AMES实验仪

慧荣和全自动 AMES 仪适用用于检测食品、保健品、化妆品、药品和新化合物等的致突变性。

应用案例

Ames试验与HPRT试验两种方法对6种氧化型染发剂的检测[1]
采用慧荣和全自动 AMES 仪,通过细菌回复突变试验(Ames试验)和体外哺乳动物细胞基因突变试验(HPRT试验)两种方法检测氧化型染发剂,并对其结果进行分析比较,探讨两种方法在检测氧化型染发剂致突变性中的应用。 

Ames 试验过程

将5 种试验菌株分别接种于8 mL营养肉汤中,于37 ℃培养12 h,菌液划线接种于预先制备的相应的主平板中,TA97a、TA98 和TA100接种于氨苄-青霉素主平板,TA102接种于四环素主平板,TA1535接种于组氨酸-生物素主平板。37 ℃培养48 h,待长至典型菌落后置2~8 ℃冰箱保存。试验前,分别从主平板上选取相应单菌落接种于25 mL营养肉汤增菌培养,即置于37 ℃恒温培养箱中振荡(100次/min)培养10 h,备用。
根据受试物的毒性和溶解度,在加S9和不加S9代谢物活化系统条件下分别进行试验,各受试物分别设4个剂量组,同时设空白对照组、溶剂(灭菌水)对照组及阳性对照组。在加S9 条件下,TA97a、TA98 和TA100 以DMSO 溶解的2-氨基芴为阳性对照,浓度为10.0 μg/皿;TA102以DMSO溶解的1,8-二羟蒽醌为阳性对照,浓度为 50.0 μg/皿;TA1535 以DMSO 溶解的2-氨基蒽为阳性对照,浓度为3.0 μg/皿。在不加S9条件下,TA97a和TA98以50.0 μg/皿的敌克松水溶液为阳性对照;TA100 和 TA1535 以 1.5 μg/皿的叠氮化钠水溶液为阳性对照;TA102 以4.0 μg/皿的丝裂霉素C水溶液为阳性对照。用全自动Ames 实验仪按技术规范的要求设置仪器参数进行试验,即2.0 mL顶层培养基、0.1 mL 菌液、0.1 mL 相应受试物、0.5 mL S9或0.5 mL PBS,待平皿冷凝固化后,倒置于37 ℃生化培养箱里培养48 h,计数每皿回变菌落数。计算各菌株各剂量3个平板回变菌落数的均值和标准差。
受试物诱发 TA97a、TA98、TA100、TA102 回变菌落数是溶剂对照组的2 倍或2 倍以上,受试物诱发TA1535 的回变菌落数是溶剂对照组的3 倍或3 倍以上,并出现以下情形之一,则该受试物判定为致突变阳性:①呈剂量-反应关系;②任何一个剂量条件下,出现阳性反应并有可重复性。受试物经上述5 个试验菌株测定后,只要有1 个试验菌株,无论在加S9或不加S9条件下为阳性,均可报告该受试物细菌回复突变试验为致突变阳性。反之为阴性。
 

参考文献

[1]陈秀娟,李培宁,江漪,等.Ames试验与HPRT试验两种方法对6种氧化型染发剂的检测[J].癌变.畸变.突变, 2023, 35(1):57-62. 

方案优势

1) 全自动 AMES 仪是一台依据 AMES 实验 ( 细菌回复突变实验 ) 标准流程开发的自动化实验仪器。

2) 该仪器将底层培养基分装、加样、移液、混匀、铺板等一系列操作实现全自动化,实验过程中无需人工值守,可极大减少 AMES 实验初期繁复的人工操作,减少人为误差,提高实验效率和实验精度。

3) 优质的售后技术服务,协助用户进行相关设备及实验活动评审。